小鼠原代骨骼肌衛(wèi)星原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
商品屬性：
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號(hào) | EY-XY3777 |
種屬來源 | 小鼠 | 組織來源 | 肌肉組織 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態(tài)特征 | 成纖維細(xì)胞樣 |
形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
培養(yǎng)基：小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞wan全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
細(xì)胞基本屬性：
種屬來源：小鼠
組織來源：肌肉組織肌肉組織
生長特性：貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：
產(chǎn)品貨期：5-6周左右
運(yùn)輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制：僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：:小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞采用胰蛋bai酶-膠原酶混合消化法結(jié)合多次差速貼壁法制備而來，小鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞分離自四肢肌肉組織；肌衛(wèi)星細(xì)胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細(xì)胞）外的一種扁平、有突起的細(xì)胞。附著于肌纖維（肌細(xì)胞）表面；當(dāng)肌纖維（肌細(xì)胞）受損后，肌衛(wèi)星細(xì)胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細(xì)胞）的修復(fù)，因此具有干細(xì)胞性質(zhì)。骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段，叫做一個(gè)肌節(jié)。肌衛(wèi)星細(xì)胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細(xì)胞）外的一種扁平、有突起的細(xì)胞。著于肌纖維（肌細(xì)胞）表面；當(dāng)肌纖維（肌細(xì)胞）受損后，肌衛(wèi)星細(xì)胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細(xì)胞）的修復(fù)，因此具有干細(xì)胞性質(zhì)。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結(jié)締組織等?：將組織從動(dòng)物體中取出，并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時(shí)間短，冷消化時(shí)間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過濾、計(jì)數(shù)?：將消化后的細(xì)胞吹打到一個(gè)離心管中，然后過濾、計(jì)數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
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