實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
恒河猴腎細(xì)胞；MMK2 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63736 |
細(xì)胞名稱 恒河猴腎細(xì)胞；MMK2
形態(tài)特性: 上皮樣，多角形
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞來源于一雌性獼猴的腎組織。2000年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法（-）
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Luteolin 5-methyl ether
CAS No.：58115-29-0
中文名：木犀草素-5-甲醚
分子式：C16H12O6
噻酰草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 趨因子C基元受體1(XCR1) 規(guī)格： 0.1g
硅唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 趨因子C基元配體2(XCL2) 規(guī)格： 0.1g
螺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 趨素(CHEM) 規(guī)格： 0.1g
芐呋;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 趨素(CHEM) 規(guī)格： 0.1g
基畏;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 超氧物歧酶(SOD) 規(guī)格： 0.1g
基阿維菌素;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品（ 訂購(gòu)|咨詢 超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 0.1g
京平（格泊素）對(duì)照品;有報(bào)告 訂購(gòu)|咨詢 超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 20mg
D水蘇糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 1g
鞣花;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： 0.1g
基小檗 訂購(gòu)|咨詢 超氧物歧酶1(SOD1) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
6″O木糖苷 訂購(gòu)|咨詢 博來水解酶(BLMH) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
檸檬酯C 訂購(gòu)|咨詢 斯鈣素1(STC1) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
巨大戟5,20縮3當(dāng)歸酯 訂購(gòu)|咨詢 斯鈣素1(STC1) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
Dapagliflozin 訂購(gòu)|咨詢 斯鈣素2(STC2) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
長(zhǎng)春 訂購(gòu)|咨詢 聯(lián)會(huì)復(fù)合體蛋白3(SYCP3) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
異丹葉大黃素 訂購(gòu)|咨詢 聯(lián)會(huì)蛋白(GMNN) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
無水檸檬 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI) 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg
GTSE1/G2 and S phase expressed 1 G2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cytisine
HIPK4 同源相互作用蛋白激酶4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Irbesartan
AMBRA1 自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 5'O(4,4'Dimethoxytrityl)thymidine3'Osuccinic acid
IBRDC2/RNF144B E3泛素蛋白連接酶144B抗體（環(huán)指蛋白144B） 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml D(?)Salicin
JMY 連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml D(?)Salicin
LRDD/PIDD 富含亮重復(fù)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnolol
MCG10 RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnolol
NME6/IPIA ALPHA P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Esomeprazole magnesium trihydrate
銀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Anthraquinonesulfonicacidsodiumsaltmonohydrate 含量:BR，99%
吲哚甲 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Indolecarboxaldehyde 含量:BR，強(qiáng)度1200
吲哚 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IUPAC 含量:USP級(jí)，95%
吲哚 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IAANa 含量:生物技術(shù)級(jí)，770ug/mg
吲哚鉀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IPAK 含量:BR，1%
吲哚 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IPA 含量:高純，98%
吲哚丁鉀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IBAK 含量:BR，780µg/mg
吲哚丁 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IUPAC 含量:BR，0.4%
吲哚酚β葡糖苷 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IndoxylGlucoside 含量:BR
茚滿 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Indan 含量:AR，99.8%
恒河猴腎細(xì)胞；MMK2鐵細(xì)菌培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于鐵細(xì)菌的分離培養(yǎng)
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格：250g用途：用于選擇性分離培養(yǎng)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）
YEP培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于膿桿菌的增菌培養(yǎng)
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基規(guī)格：1000ml用途：用于志賀氏菌顯色培養(yǎng)
Candida Elective 瓊脂規(guī)格：250g用途：用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測(cè)定
卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格：250g用途：用于分離培養(yǎng)，需添加50%卵黃乳液(Japan方法)
點(diǎn)擊放大
會(huì)員_a.png)