產品及特點：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
沿岸單孢子蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Haplosporidium costale | EY00P9003 |
運輸及保存： 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為12個月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對，定量表達分析，定性分析，SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品，設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復，則標記N+9個PCR 管，其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照（用水做模板），6個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復，則標記N+4 個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1個用于PCR陽性對照（用第4號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
2’-脫氧鳥苷;2'-dG橙黃決明素(標準品) Pamoic acid
2‘-脫氧胞苷橙皮（標準品） Phenolphthalein
2‘-脫氧胞苷(標準品） Vanillin
2‘-脫氧胞苷橙皮素(標準品) Ciclopirox
2‘-脫氧胞苷(標準品)匙羹藤苷元 Ciclopirox
2’-脫氧腺苷匙羹藤新苷元 Sulfanilamide
2’-脫氧腺苷匙羹藤葉（標準品） Sulfamethazine
2’-脫氧腺苷匙羹藤皂苷C（標準品） Sulfamethazine
魚精DNA赤脛散（標準品） Saccharin
鮭魚精DNA赤芍(川赤芍)（標準品） Phenolphthalein
5-氟脫氧胞苷赤芍（標準品） Salicylic acid
5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷蟲草素(標準品) Propacetamol HCl
5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷臭靈丹（標準品） Propacetamol HCl
5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷臭梧桐葉（標準品） Naphazoline hydrochloride
鳥苷;核苷川貝母（標準品） POLYETHYLENE GLYCOL MONO-4-NONYLPHENYL ETHER
沿岸單孢子蟲探針法PCR熒光定量試劑盒紅細胞生成素(EPO)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸三氟拉 質量規格：分析標準品100mL
血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸三氟拉(標準品) 質量規格：分析標準品100mL
平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)(酶聯免疫吸附試驗法)皮質甾酮/腎上腺酮 質量規格：分析標準品,>99.0%(GC)100mL
堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)(酶聯免疫吸附試驗法)皮質甾酮/腎上腺酮 質量規格：分析標準品,用于環境分析100mL
軸突生長誘向因子1(Ntn1)(酶聯免疫吸附試驗法)皮質甾酮(標準品) 質量規格：分析標準品,≥99.8%(GC)100mL
表面活性物質關聯蛋白C(SPC)(酶聯免疫吸附試驗法)二硫化四乙基秋蘭姆 質量規格：分析標準品100mL
Toll樣受體2(TLR2)(酶聯免疫吸附試驗法)二硫化四乙基秋蘭姆 質量規格：分析標準品100mL
Toll樣受體4(TLR4)(酶聯免疫吸附試驗法)雙硫侖(標準品) 質量規格：分析標準品,>99.5%(GC)100mL
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